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“上海勁馬”文獻:CD4 + CD25 + 調節性 T 細胞及 TGF-β在肺炎支原體肺炎患兒中的表達和意義

發布日期:2019/6/6 16:19:58 閱讀次數:293次

“上海勁馬”文獻:CD4 + CD25 + 調節性 T 細胞及 TGF-β在肺炎支原體肺炎患兒中的表達和意義

劉小群,陳蘭舉,陳嘯洪,張佩紅
摘要: 目的  初步探討CD4 +  CD25 +  調節性T 細胞( Treg) 及轉化生長因子-β  ( TGF-β  ) 在肺炎支原體肺炎( MPP) 發病中的作用及可能機制。
方法   采用流式細胞術( FCM) 和 ELISA 法分別檢測 2  組小兒( MPP 組及健康對照組) 外周血 CD4 + CD25 + Treg 細胞的比例及血清 TGF-β 水平,并分析二者之間的相關性。
結果 ①MPP 組患兒外周血中 CD4 +  CD25 +  Treg 細胞比例和血清 TGF-β   水平分別為[(5. 59%  ± 1. 18% ) 和(467. 74 ± 142. 05) ng / L],
與健康對照組[(8. 20%  ± 1. 76% ) 和(730. 05 ± 197. 21) ng / L]相比,均顯著降低( P < 0. 01);②MPP 組小兒血清 TGF-β   水平與 CD4 +  CD25 +  Treg 細胞比例呈正相關( r = 0. 71,P < 0. 01)。
結論  CD4 +  CD25 +  Treg 細胞比例及 TGF-β1 水平的降低可能參與 MPP 的發病。
關鍵詞: CD4 + CD25 + 調節性 T 細胞;TGF-β ;小兒;肺炎支原體;肺炎
中圖分類號:  R725. 6    R563. 1   
文獻標識碼:  A   
文章編號:1674-4152(2015)06-0971-03
肺炎支原體( Mycoplasma  Pneumoniae,MP) 是一種介于細菌和病毒之間的、能獨立生活的微生物,已成為小兒下呼吸道感染的主要病原體。隨著對 MP 基礎研究的不斷深入,認為 MP 除與呼吸道上皮細胞吸附及直接作引起肺炎支原體肺炎( Mycoplasma Pneu- moniae  Pneumonia,MPP) 外,細胞免疫反應也參與其中[1]。CD4 + CD25 + 調節性 T 細胞( CD4 + CD25 + regu- latory T cells,Treg) 因具有強大的免疫抑制功能而成為研究的熱點,可能主要通過直接接觸和分泌抑制性細胞因子( 如 TGF-β) 兩大途徑發揮免疫功能。本文通過檢測 MPP 患兒外周血 CD4 + CD25 + Treg 細胞比例及血清轉化生長因子-β1( TGF-β ) 水平,初步探討 CD4 + CD25 + Treg 及 TGF-β 在 MPP 發病中的作用及可能機制。
1 資料與方法
1. 1 臨床資料 選擇 2009 年 11 月—2012 年 3 月在蚌埠醫學院*附屬醫院住院并診斷為 MPP 的患兒30 例設為 MPP 組,平均年齡(4. 8 ± 1. 2) 歲,其中男 16例,女 14 例。診斷參照《實用兒科學》第七版關于肺炎支原體診斷要點[2]。選擇同期門診健康體檢兒童30 名設為健康對照組,平均年齡(4. 3 ± 1. 5) 歲,其中男 15 例,女 15 例。2  組間年齡、性別差異無統計學意義( P > 0. 05)。
1. 2 主要試劑 FITC 標記小鼠抗人 CD25 單克隆抗體、PerCP 標記小鼠抗人 CD4 單克隆抗體、溶血素,均購自美國 BD 公司;PBS 緩沖液( 自備) ,人 TGF-β1  試劑盒( 上海勁馬生物科技有限公司)。
1. 3 檢測方法
1. 3. 1 流式細胞儀檢測外周血 CD4 + CD25 + Treg 的比例  無菌操作靜脈取血 2  ml,EDTA 抗凝。標本管編號 A,取兩只流式專用管 A1、A2,A2 管加入 CD4-Per-CP、CD25-FITC 各 50 μl。再在 A1、A2 管中分別加入全血100 μl,混勻,置37 ℃ 水浴箱,避光孵育15 min 后加入溶血素 2  ml,室溫避光孵育 10  min。3000  r / min離心 5  min,棄上清液。然后用 PBS  2  ml 洗滌細胞 2次,3000 r / min 離心 5 min,棄上清液。0. 5 ml 的 1% 多聚甲醛重懸細胞,待上機檢測。


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